前列腺表面膜抗原适配子-阳离子脂质体-双小干扰RNA复合物治疗前列腺癌的体外分析

摘要：

目的 制备基于前列腺表面膜抗原(prostate surface membrane antigen,PSMA)适配子靶向前列腺癌的双小干扰RNA(small interference RNAs,siRNA)的新型阳离子脂质体,并分析该适配子-脂质体-双siRNA复合物对前列腺癌细胞的靶向性及抑制增殖作用.方法 采用逆向蒸发法制备阳离子脂质体-双siRNA[Polo样激酶1(Polo-Like Kinase 1,PLK1)和B7H3(B7-homolog 3)基因]复合物,并对阳离子脂质体、鱼精蛋白与总siRNA比例进行优化.脂质体包裹双siRNA后,通过特异反应插入PSMA适配子A10.对PSMA适配子介导的双siRNA靶向入胞递送系统进行粒径和Zeta电位评价;以LNCap细胞为模型,Western blot法检测脂质体-双功能siRNA对靶基因的沉默效应;基于竞争结合的流式法检测递送系统对靶细胞的亲和性;增殖活性试验检测递送系统体外对前列腺癌细胞的抑制作用.结果 阳离子脂质体与总siRNA的最佳比例为300∶1,鱼精蛋白与总siRNA的最佳比例为1.7∶1.A10-脂质体-双siRNA递送系统可以与细胞表面PSMA抗原结合,具有较高的细胞亲和性;对LNcap细胞中PLK1和B7H3基因可以高效沉默;对肿瘤细胞增殖的抑制作用大于单独沉默PLK1或B7H3基因,双沉默siRNA递送系统在抑制肿瘤细胞生长方面具有协同效应.结论 制备的PSMA适配子-脂质体-双siRNA递送系统具有前列腺癌细胞靶向性,且在抑癌方面可以发挥协同作用,提示了该双功能siRNA基因治疗药物系统的潜在应用性.

关键词：小干扰RNA、前列腺表面膜抗原、适配子、脂质体、PLK1、B7H3、前列腺癌

所属期刊栏目：29

分类号：R737.25;R979.1+9(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助81272701;军事医学科学院创新基金课题2012CXJ5046.

在线出版日期：2016-03-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：151-156