抗肿瘤坏死因子-α单克隆抗体体外生物学活性检测方法的优化及验证

摘要：

目的 优化抗肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)单克隆抗体体外生物学活性的检测方法,并进行验证.方法 对TNF-d单克隆抗体体外生物学活性检测方法中的结晶紫染色液浓度、细胞浓度、放线菌素D(ActD)浓度及TNF-α杀伤浓度进行优化,并对该方法的精密度及专属性进行验证.绘制质量控制图,对抗TNF-α单克隆抗体样品进行20次重复检测.结果 结晶紫染色液、细胞浓度、ActD和TNF-α的最适浓度分别为0.2％、1.5×105个/ml,1 ng/ml和0.8μg/ml.同一人员于不同日6次重复测定参考品的半数有效浓度(ED50)均值为(44.18±6.858) ng/ml,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为15.522％;不同日由3位不同人员重复测定参考品的ED50均值为(41.19±3.05) ng/ml,RSD值为7.40％;在TNF-α浓度一定的情况下,随着抗TNF-α单克隆抗体和阳性对照Humira浓度的降低,细胞的存活率随之降低,其他抗体无此现象.抗TNF-α单克隆抗体样品的20次测定结果均成立.结论 成功优化了抗TNF-α单克隆抗体体外生物学活性检测方法的条件,该方法具有良好的精密度及专属性.

关键词：肿瘤坏死因子-α、单克隆抗体、生物学活性

所属期刊栏目：28

分类号：R392-33

资助基金："十二五""重大新药创制"科技重大专项原创性全人源单克隆抗体药物研发技术平台的建立及应用2011ZX09506-005.

在线出版日期：2015-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1202-1205,1210