重组人生长激素的分离纯化及其结构确证
目的 对重组人生长激素(recombinant human growth hormone,rhGH)进行分离纯化,并进行结构确证.方法 取rhGH工程菌菌体,进行初步纯化(低渗抽提法、盐析法)及层析纯化(Sephadex G-25分子排阻层析、DEAE-Sephadex.F.F离子交换层析、Phenyl-Sepharose.F.F疏水层析、Phenyl S-100HR分子排阻层析),收集纯化产物,进行15% SDS-PAGE分析、相关蛋白含量检测、高分子蛋白含量检测,并进行分子量检测、氨基酸组成分析、N-末端氨基酸序列分析、C-末端氨基酸序列分析和等电聚焦电泳.结果 纯化产物的相对分子质量22 125,纯度可达99.5%以上,rhGH蛋白总收率为13.36%,相关蛋白含量为1.55%,高分子蛋白含量低于0.1%;相对分子质量、氨基酸组成、N-末端氨基酸序列、C-末端氨基酸序列及等电点等均与rhGH国际标准品一致.结论 纯化后获得了高纯度的rhGH蛋白,该纯化工艺简单、高效,为本产品的工业化生产奠定了基础.
人生长激素、纯化、结构确证
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Q575+.11(激素)
2015-12-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1153-1156