一株副溶血性弧菌裂解性噬菌体的分离、鉴定及其生物学特性
目的 从贝类样品中分离一株副溶血性弧菌裂解性噬菌体,并对其进行鉴定及生物学特性分析.方法 采用双层平板法从贝类样品中分离副溶血性弧菌噬菌体,观察噬菌斑特征;利用聚乙二醇8000浓缩噬菌体颗粒,CsCl等密度梯度离心纯化;采用透射电镜观察磷钨酸负染的噬菌体大小和形态,酚-氯仿法提取噬菌体核酸,通过限制性核酸内切酶处理分析其核酸类型;常规方法分析噬菌体的热稳定性、最适培养温度、最适盐浓度、pH稳定性及对氯仿、乙醚的敏感性,并测定噬菌体最佳感染复数(MOI),绘制一步生长曲线.结果 分离获得了一株副溶血性弧菌裂解性噬菌体,命名为VpJYP1;其噬菌斑中心透明区域直径为1.5~2.5mm,外有晕圈,直径为8~ 11 mm;透射电镜观察显示,其头部呈二十面体立体结构,直径约60 nm,尾部宽约8 nm,长约20 nm,按国际病毒分类委员会分类标准,其符合短尾病毒科(Podoviridae)特征;VpJYP1核酸为双链DNA;生物学特性分析显示,VpJYP1在40—60℃稳定,最佳培养温度为36℃,最适盐浓度为3% ~ 4%,在pH5~ 11稳定,对氯仿、乙醚均不敏感,最佳MOI为0.001,感染宿主菌的潜伏期约为5 min,裂解期约为45 min,裂解量约为110.结论 分离得到的VpJYP1属于短尾病毒科裂解性噬菌体,具有副溶血性弧菌生物抑菌剂的应用潜力.
副溶血性弧菌、裂解性噬菌体、分离、生物学特性
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Q812(生物工程学(生物技术))
黄海水产研究所级基本科研业务费20603022015008;国家科技支撑计划项目2015BAD17B00.
2015-12-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1147-1152,1156