培养基中氯化钠对百日咳杆菌CS株生长及百日咳毒素表达的影响

摘要：

目的 探讨培养基中氯化钠(NaCl)对百日咳杆菌CS株生长及百日咳毒素(pertussis toxin, PT)表达的影响,确定最适PT表达的NaCl加入方式.方法 以MSS为起始培养基,补加不同浓度的NaCl溶液,接种生产用百日咳杆菌Ⅰ相CMCC58003(CS株)后,分别于不同时间取样;分别于接种菌种后不同时间补加NaCl至7.5 g/L,于培养结束时(39 h)取样;分别于接种菌种后0和25 h时补加NaCl至7.5 g/L,培养不同时间取样.上述样品分别测定菌浓度及PT表达量.结果 起始培养基中NaCl浓度越高,细菌生长越缓慢,菌浓度增加时间也越长,起始培养基中NaCl浓度为7.5 g/L时,培养上清中PT表达量最高,达6.61 μg/ml,比对照培养基(MSS)提高了15.6％.培养过程中在25 h时补加NaCl,培养结束时PT表达量最高,为8.64 μg/ml,比对照培养基(MSS)提高了43.28％,比0h时补加NaCl提高了26.13％.在25 h时补加NaCl后,细菌的菌浓度增长期比MSS培养基培养延长了2～3h,比0h时补加NaCl缩短了1-2h,菌浓度在培养的中后期明显高于0h时补加NaCl,PT表达周期与生长曲线基本平行,当细菌生长进入衰退期时,PT也随之开始逐步降解.结论 在培养前期,可采用含2.5 g/L NaCl的MSS培养基使菌体快速生长,当进入抗原PT表达期后,可通过补加NaCl来提高PT转录活性,从而提高PT的产量.

关键词：MSS培养基、氯化钠、百日咳杆菌、百日咳毒素

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分类号：R378.4+2;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家"十二五"重大新药创制专项2013ZX09402-302-005.

在线出版日期：2015-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1138-1141