狂犬病病毒CTN株反向遗传系统的改造及拯救

摘要：

目的 对狂犬病病毒CTN株反向遗传系统进行改造,并拯救改造后的狂犬病病毒.方法 应用基因定点突变技术分别对狂犬病病毒CTN株G蛋白的第194位和333位氨基酸进行定点突变,将突变后的G蛋白基因替换原有反向遗传系统中的G蛋白基因,同时对突变后的G蛋白基因进行拷贝,分明构建含有1、2和3个改造后G蛋白基因全长序列的感染性克隆,并将其分别与辅助质粒共转染BSR细胞,采用直接免疫荧光实验(DFA)和RT-PCR法鉴定重组病毒.结果 G蛋白的第194位天冬酰胺突变为丝氨酸,第333位谷氨酰胺突变为谷氨酸,获得含有1、2和3个突变后G蛋白基因的狂犬病病毒CTN株反向遗传系统,并拯救出重组狂犬病病毒.结论 成功对狂犬病病毒CTN株反向遗传系统进行了改造,并拯救出了重组病毒,为研制安全、稳定、高效的新型狂犬病病毒疫苗奠定了基础.

关键词：狂犬病病毒、CTN株、反向遗传学、定点突变、G基因

所属期刊栏目：28

分类号：R373.1+6;Q78(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2015-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1121-1126