运用DOE法优化表达抗人类表皮生长因子受体2单克隆抗体细胞用培养基
目的 运用实验设计(design of experiments,DOE)方法优化表达抗人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)单克隆抗体细胞用培养基,以提高抗体表达量.方法 利用Minitab软件进行DOE,考察不同基础培养基、补料培养基对工程细胞株(CHO-DG44)的细胞密度和抗HER2单克隆抗体表达的影响.结果 经过DOE方法优化,在最优培养基组合中工程细胞株的最高活细胞密度(peak viable cell density,PVCD)达296×1 05个/ml,抗体表达量最高达2.07 g/L,比DOE优化之前最高试验组表达量(1.20 g/L)提高了72%,所表达抗体的质量与原研对照品非常一致.结论 得到l组较优的基础培养基与补料培养基配比与组合,该培养基组合提高了细胞密度与抗体表达量,且其适合抗HER2单克隆抗体生产使用,表明DOE是一种短期快速提高抗体表达行之有效的方法.
实验设计、人类表皮生长因子受体2、单克隆抗体、培养基
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Q819(生物工程学(生物技术))
深圳市生物、互联网、新能源、新材料产业发展专项资金ZD201111070090A;深圳市科技创新委资助项目GGJS-201303311523444401.
2015-11-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1077-1083