EV71灭活疫苗(人二倍体细胞)灭活工艺验证
目的 对肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)灭活疫苗(人二倍体细胞)的灭活工艺进行验证.方法 取3批次经甲醛灭活的EV71灭活病毒收获液样品,分别连续盲传4代,并设病毒对照盲传4代.观察每代次样品的细胞病变情况,采用微量滴定法检测病毒感染性滴度,ELISA法检测EV71特异抗原含量,实时定量PCR法检测病毒核酸水平及病毒负链产生情况.结果 3批灭活的疫苗病毒收获液样品经4次盲传后,各代次均未出现明显的细胞病变,经微量滴定法均未检测到EV71感染性滴度.灭活的病毒收获液盲传至第2代时,病毒负链检测已为阴性;至第3代时,EV71抗原检测为阴性;至第4代时,病毒核酸检测为阴性.病毒对照经盲传4代后,各代次均出现明显细胞病变;自第2代开始,感染性滴度维持在106～ 107 CCID50/ml,抗原含量为200 ～ 370 U/ml,且均可检测出明显的病毒核酸及病毒负链增殖.结论 通过经典的"细胞上盲传3代"的检测方法,并结合实时定量RT-PCR对病毒核酸和负链进行检测,证实经甲醛灭活的EV71灭活疫苗样品已完全灭活.
肠道病毒71型、灭活、工艺验证
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R373.2;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
863计划2012AA02A404;重大新药创制2012ZX091-01319002,2014ZX09102042001;云南省技术创新人才2014-HB066.
2015-11-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1063-1066,1071
