恶性疟原虫环子孢子蛋白四肽重复序列单克隆抗体的制备

摘要：

目的 制备针对恶性疟原虫环子孢子蛋白(circumsporozoite protein,CSP)NANP四肽重复序列[Asn-Ala-Asn-Pro(NANP) repeated motif]的单克隆抗体.方法 采用马来酰亚胺修饰的BSA与(NANP)5C偶联法及ADH-EDC介导的BSA与(NANP)5偶联法,将合成的NANP多肽与载体蛋白偶联,免疫BALB/c小鼠后,采用免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0杂交的细胞融合技术,获得分泌抗(NANP)5多肽单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株,间接ELISA法检测效价.通过免疫F1小鼠诱生腹水,采用50％硫酸铵沉淀法盐析纯化后,进行单克隆抗体亚类和特异性鉴定.结果 采用2种方法制备了BSA-(NANP)5偶联蛋白,以该蛋白为抗原,获得10株抗(NANP)5多肽阳性杂交瘤细胞株,效价在1:80000～1:640000之间,均为IgGl亚类,轻链类型为κ,可被(NANP)5及CSP抗原特异性识别.结论 成功制备了抗(NANP)5多肽的单克隆抗体,该抗体可在恶性疟疾疫苗的研发中发挥重要作用.

关键词：疟疾、环子孢子蛋白、NANP、四肽重复序列、单克隆抗体

所属期刊栏目：28

分类号：R382.3+1;R392-33(医学寄生虫学)

在线出版日期：2015-11-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1039-1043