肺炎链球菌荚膜多糖分子大小及分子量分析方法的比较
目的 3种方法分析10个血清型肺炎链球菌荚膜多糖(pneumococcal capsular polysaccharides,PnPs)样品的分子大小及分子量,并对这3种方法进行比较.方法 采用Sepharose CL-4B凝胶排阻层析(SEC)技术检测1型、2型、4型、8型、9N型、12F型、14型、18C型、19A型和23F型PnPs各2～3批次样品在色谱柱中的分配系数(K0)和样品组分特征;采用高效凝胶排阻色谱-示差折光检测器(high performance size-exclusion chromatography with refractive index,HPSEC-RI)法建立Pullulan标准品分子量标准曲线,计算各PnPs样品的重均分子量(weight-average molecularweight,Mw);采用高效凝胶排阻色谱-多角度激光光散射仪/示差折光检测器联用技术(high performance size-exclu-sion chromatography with multi-angle laser light scattering and refractive index,HPSEC-MALLS/RI)检测各PnPs样品的Mw、数均分子量(number-average molecular weight,Mn)、多分散水平(Mw/Mn)及均方根旋转半径(root mean square ratio of gyration,Rg);对HPSEC-RI法和HPSEC-MALLS/RI法检测Pullulan分子量标准品的结果进行比较.结果 SEC技术不同化学方法检测的同批次PnPs样品的KD值十分接近,且主峰形态也比较近似,个别批次PnPs不同化学方法获得的峰形有差别.经HPSEC-RI检测Pullulan分子量标准品获得的回归方程为y=-0.278x+10.13,r2=0.998,各PnPs样品的分子量为1.812× 105～ 1.246× 106.HPSEC-MALLS/RI联用技术检测的各批PnPs样品的Mw分布于9.898×105～ 1.471×105,Rg为84.9～25.4 nm,同一血清型不同批次样品Rg间的大小关系与其Mw间的大小关系具有较好一致性.结论 结合多种方法检测多糖样品的分子大小和分子量,可更客观、全面地了解PnPs分子的各种性质.
肺炎链球菌荚膜多糖、分子大小、分子量
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R378.1+4;O656.3(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
2015-10-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
947-955,960
