冷应激前后大鼠心脏、肝脏及脾脏中α-烯醇化酶基因mRNA的转录水平

摘要：

目的 研究冷应激前后大鼠心脏、肝脏、脾脏中α-烯醇化酶(α-enolase,ENO1)基因mRNA的转录水平.方法 将大鼠随机分为正常对照组(24℃,正常饲喂7d)和冷应激组(置4℃,应激12 h),提取各组大鼠心脏、肝脏及脾脏细胞总RNA,反转录成cDNA,以其为模板,PCR扩增ENO1基因,应用生物信息学软件DNAstar进行同源性分析,实时荧光定量PCR法检测大鼠心脏、肝脏、脾脏中ENO1基因mRNA的转录水平.结果 冷应激前后大鼠心脏、肝脏及脾脏总RNA的1％琼脂糖凝胶电泳可见28S、18S和5S 3条带,A260/A280值为1.8～2.0;ENO1基因经2％琼脂糖凝胶电泳分析可见107 bp的目的基因条带;ENO1基因序列与NCBI上公布序列的同源性为100％;冷应激组大鼠肝脏、脾脏组织中ENO1基因mRNA的转录水平明显高于正常对照组(P＜0.01),正常对照组大鼠心脏组织中ENO1基因mRNA转录水平明显高于冷应激组(P＜0.05).结论 冷应激前后大鼠心脏、肝脏及脾脏中ENO1基因mRNA的转录水平均发生显著改变,本实验为动物应激状态评估及应激发生机制的研究提供了实验依据.

关键词：冷应激、α-烯醇化酶、基因转录、实时荧光定量PCR

所属期刊栏目：28

分类号：Q593

资助基金：国家自然科学基金青年基金项目31302052;黑龙江省自然科学基金面上项目C2015041.

在线出版日期：2015-10-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：929-933