THP-1分化巨噬细胞用于检测细胞免疫的体外方法的建立
目的 建立THP-1分化巨噬细胞用于检测细胞免疫的体外方法.方法 将HPV治疗性疫苗原液参考品及样品用含佛波酯(phorbol myristate acetate,PMA)的RPMI1640培养基稀释后,加入THP-1细胞,设PMA对照(只加PMA),37℃,5％ CO2培养箱孵育,取上清,检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量,测定样品体外相对效力.按上述方法对细胞密度(2.0×105、5.0× 105、10.0×105个/ml)、PMA终浓度(2.8、8.3、25、75、225 ng/ml)和培养时间(2、3、4d)进行优化,确定最佳检测条件.用HPV预防性疫苗原液及ELISPOT法验证该方法的有效性.结果 优化的最佳检测条件为:细胞密度5.0×105个/ml,PMA终浓度25 ng/ml,培养时间3d.验证结果表明该方法有效可行.结论 建立了THP-1分化巨噬细胞用于检测细胞免疫的体外方法,为检测治疗性疫苗的细胞免疫提供了一个体外检测平台.
THP-1细胞、巨噬细胞、细胞免疫、佛波酯、肿瘤坏死因子-α
28
R392-33
2015-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
749-752
