用无血清适应的Vero细胞培养H5N1型流感病毒条件的优化
目的 优化无血清适应的Vero细胞(SFM-Vero细胞)培养H5N1型流感病毒的条件.方法 将H5N1型流感病毒接种于SFM-Vero细胞,于免疫荧光显微镜下观察病毒感染情况.对病毒无血清培养条件MOI(0.05、0.10、0.15、0.20)、细胞培养时间(12、24、36、48 h)、培养液基础培养基(DMEM/F12、M199、RPMI1640及MEM:DMEM/F12混合液)、培养温度(33、33.5、34、34.5、35和37℃)、收获时间(24、36、48、60和72 h)、培养液pH值(6.8、7.1、7.4、7.7、8.0和8.3)和TPCK胰酶浓度(0.5、1.0、1.5 μg/ml)进行优化,并检测最佳条件无血清培养的H5N1型流感病毒的血凝效价及形态.结果 H5N1型流感病毒对SFM-Vero细胞具有感染性.最佳无血清培养条件为:MOI=0.1和0.15,细胞培养时间36 h,以DMEM/F12为基础培养基,病毒培养温度33.5和34.5℃,病毒收获时间60 h,培养液pH 7.7,TPCK胰酶浓度为1.0 μg/ml.最佳条件无血清培养的H5N1型流感病毒的血凝效价为1∶512,电镜下观察病毒形态完整.结论 确定了H5N1型流感病毒对SFM-Vero细胞具有感染性,并优化了SFM-Vero细胞培养流感病毒的适宜条件,为更具有生物安全性流感疫苗的研发奠定了基础.
无血清培养、Vero细胞、H5N1型流感病毒
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R373.1+1;R186+.3(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
重大传染病专项2013ZX10004003003;科技部对俄合作专项2011DFR30420;国家8632012AA02A404任务7.
2015-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
741-745
