基于双向凝胶电泳/基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱技术的腐蹄病奶牛血浆蛋白质组学轮廓分析
目的 利用双向凝胶电泳/基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱(two-dimensional electrophoresis matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,2DE/MALDI-TOF-MS)技术,筛选、鉴定腐蹄病奶牛血浆差异表达蛋白,并进行血浆蛋白质组学轮廓分析.方法 选取20头腐蹄病奶牛为实验组,20头健康奶牛为对照组,采血,分离血浆,2DE筛选差异表达蛋白点,MALDI-TOF-MS鉴定差异表达蛋白,并对其进行生物信息学分析(GO分析和KEGG pathway数据库).根据2DE及MALDI-TOF-MS的实验结果,选取纤维蛋白原进行Western blot验证试验.结果 患腐蹄病奶牛血浆中共筛选出63个差异蛋白点,其中表达上调蛋白点14个,表达下调蛋白点49个,选取33个点进行质谱分析,得到26个阳性结果,鉴定为11种蛋白,差异表达蛋白多与炎症反应过程相关.Western blot对差异表达蛋白的验证结果与2DE结果一致.结论 奶牛腐蹄病使血浆蛋白的表达发生了变化,机体蛋白质组参与炎症反应、补体通路、凝血过程等多个机体生理和病理过程,为进一步探索奶牛腐蹄病发病机制提供理论依据.
奶牛、腐蹄病、双向凝胶电泳、基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱、蛋白质组学
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S855.1+2(动物医学(兽医学))
黑龙江省自然科学基金C201229;“十二五”农村领域国家科技课题2012BAD12B05-2;国家科技支撑计划2013BAD21B01;黑龙江省高校动物医学重点实验室开放课题AMKL2012006.
2015-08-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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