鸡胚细胞培养狂犬病病毒工艺的优化

摘要：

目的 优化鸡胚细胞(chick embryo cells,CECs)培养狂犬病病毒(rabies virus,RV)的工艺.方法 以M199为基础培养基,向其分别加入人血白蛋白、胎牛血清及HEPES缓冲液,并均加入碳酸氢钠,配制培养基M1、M2和M3.将驯化获得的CTNCEC25株按1∶5 000的比例接种子CECs悬液中,在不同培养条件下,通过单因素试验初步确定培养基配方、培养温度、接种MOI及培养时间4大工艺参数范围,再以正交试验确定上述条件的最佳组合.结果 单因素试验初步确定的工艺参数:采用M2或M3,培养温度为33～ 36℃,MOI=0.01 ～0.001 FFU/细胞,培养时间为72～120 h,可获得较高的病毒滴度(7.0 lgFFU/ml以上).正交试验确定的最佳工艺条件:采用M3,培养温度为33℃,MOI=0.01 FFU/细胞,培养时间为120 h,该工艺参数获得病毒滴度可达7.5 lgFFU/ml.结论 本实验优化了CECs培养RV的工艺,CTNCEC25株的病毒滴度由约6.0 lgFFU/ml提高至7.0 lgFFU/ml以上,为疫苗生产获得理想抗原量奠定了基础.

关键词：鸡胚细胞、狂犬病病毒、工艺优化、病毒滴度

所属期刊栏目：28

分类号：R373.9;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2015-07-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：636-640