生物反应器内微载体培养细胞的胰酶消化放大技术

摘要：

目的 建立生物反应器内微载体上Vero细胞球转球胰酶消化放大技术.方法 用500 ml搅拌瓶培养Vero细胞,待细胞浓度达1.8× 106个/ml时,加入25和37℃消化液(0.25％胰酶+0.02％ EDTA)消化不同时间,计算细胞回收率及细胞活率,筛选微载体细胞最佳培养温度及消化时间.将3L反应器内微载体及T25方瓶培养的Vero细胞消化后接种T25方瓶,比较两种传代方式下的细胞形态及比生长速率.将3L反应器内微载体培养的Vero细胞用消化液消化后,按1∶3、1∶6、1∶8、1∶10、1∶12的比例接种至15 L反应器,确定最适接种比例.将转瓶及3L反应器内微载体培养的Vero细胞消化后接种至15 L反应器,比较两种放大方式下的细胞形态、密度及比生长速率.结果 微载体上培养的Vero细胞经25℃消化15 min可有效保证细胞的回收率及活率.两种传代方式下的细胞形态及比生长速率无明显区别.细胞比生长速率在1∶6～1∶10比例放大时较高.两种放大方式下的细胞形态、密度及比生长速率无明显区别.结论 初步建立了生物反应器微载体内细胞的胰酶消化球转球放大技术,Vero细胞存活率较高,贴壁良好,空珠率较低,可应用于生物反应器微载体培养系统的规模放大.

关键词：生物反应器、微载体、细胞培养

所属期刊栏目：28

分类号：R392-33

资助基金：2014年甘肃省战略性新兴产业创新支撑项目.

在线出版日期：2015-07-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：628-632