生物反应器微载体规模化培养轮状病毒重配株LH9

摘要：

目的 利用Vero细胞生物反应器微载体培养技术规模化培养轮状病毒重配株LH9(G4型).方法 用3L生物反应器,以4g/L载体浓度培养Vero细胞,待细胞浓度达1.8× 106个/ml时,分别用含2、1、0.75、0μg/ml胰酶的DMEM培养液,35 ℃连续培养21d,观察细胞生长状态.分别按0.5、0.1、0.05、0.01 MOI接种轮状病毒重配株LH9(G4),培养过程中每日取样,检测病毒滴度以及葡萄糖、乳酸含量.根据培养过程中葡萄糖、乳酸含量的变化,确定病毒培养过程中的收获时间,优化培养工艺.结果 在反应器中用含不同浓度胰酶的DMEM培养Vero细胞,细胞形态良好,与不含胰酶的DMEM培养液培养的细胞无明显差异;按0.05 MOI接种后的病毒收获液滴度较高,可达7.0 lgCCID50/ml,且持续时间较长;通过对病毒培养液中葡萄糖、乳酸含量的监测,调整了培养过程中的收获时间,收获次数增加至4次,可收获病毒液4个工作体积,病毒高峰滴度可达8.5 lgCCID50/ml.结论 采用生物反应器微载体系统培养轮状病毒重配株LH9(G4),可显著提高病毒滴度,通过对培养过程的优化,增加了病毒收获量,为进一步规模化生产轮状病毒疫苗奠定了基础.

关键词：生物反应器、微载体、轮状病毒

所属期刊栏目：28

分类号：R373.2+4;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：2014年甘肃省战略性新兴产业创新支撑项目.

在线出版日期：2015-07-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：528-530,535