Vero细胞无血清培养基的优化
目的 通过试验设计(design of experiments,DOE)方法和统计学分析快速优化Vero细胞无血清培养基.方法 以DMEM/F12为基础培养基,通过Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和Box-Behnken试验考察7种添加物胰岛素、人转铁蛋白、透明质酸、牛血清白蛋白、亚硒酸钠、表皮生长因子和高密度脂蛋白对Vero细胞生长的影响,以CCK-8测定的吸光度值(A490)为响应值,优化Vero细胞无血清培养基.用最优化的因子浓度配制的Vero细胞无血清培养基培养Vero细胞,对优化结果进行验证.结果 通过Plackett-Burman试验筛选出胰岛素、牛血清白蛋白和人转铁蛋白对Vero细胞生长影响较大;采用最陡爬坡试验和Box-Behnken试验进一步优化,Design-Expert 8.06软件进行回归分析,得到胰岛素、人转铁蛋白和牛血清白蛋白的最佳浓度分别为5.625 μg/ml、14.034 μg/ml和3.92 mg/ml,在此优化条件下的A490值为2.3,较基础培养基提高了3.41倍.用最优的胰岛素、人转铁蛋白和牛血清白蛋白浓度配制的Vero细胞无血清培养基培养Vero细胞的A490值为2.148,为预测值的93.4％,符合度较高.结论 应用DOE方法快速高效地优化了Vero细胞无血清培养基,为无血清培养基的研制奠定了基础.
Vero细胞、无血清培养基、优化、试验设计
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R392-33
863计划腮腺炎病毒疫苗等病毒性疫苗关键技术及产品开发2012AA02A404;科技部国际合作项目Sabin IPV 关键技术研究2010DF32890.
2015-07-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
518-522
