细胞因子信号抑制因子1基因真核高表达质粒的构建及其在NOK细胞中的表达

摘要：

目的 构建细胞因子信号抑制因子1(suppressors of eytokine signaling 1,SOCS1)基因真核高表达质粒,并在口腔上皮细胞系NOK细胞中进行表达.方法 提取健康人外周静脉血基因组DNA,PCR扩增SOCS1基因,与pEGFP-N1载体连接,构建重组真核表达质粒pEGFP-N1-SOCS1,用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切鉴定及测序后,转染NOK细胞,采用荧光显微镜及Western blot法检测转染细胞中SOCS1蛋白的表达.结果 重组真核表达质粒pEGFP-N1-SOCS1经双酶切及测序鉴定证实构建正确.pEGFP-N1-SOCS1转染NOK细胞72 h后获得表达,SOCS1蛋白的表达量为(134.67±9.07)％,较转染空质粒组约升高4倍,二者差异有统计学意义(P=0.001).结论 成功构建了SOCS1基因真核高表达质粒,为进一步研究SOCS1的生物学功能奠定了基础.

关键词：细胞因子信号抑制因子1、真核细胞、基因表达、NOK细胞

所属期刊栏目：28

分类号：Q257;Q782(细胞生理学)

资助基金：山西省科技工业攻关项目基金资助20110321076-02;山西省国际科技合作项目基金资助2012081050-1.

在线出版日期：2015-06-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：348-351