生物素标记的布鲁菌多克隆抗体的制备
目的 制备生物素标记的兔抗牛种布鲁菌544A多克隆抗体,并进行鉴定.方法 复苏并扩大培养牛种布鲁菌544A,灭活后制备灭活疫苗,经背部皮下多点注射免疫新西兰大白兔,5次免疫后,经心脏采血,分离血清,采用硫酸铵盐析法对血清中的多克隆抗体进行粗提,再通过蛋白亲和柱层析法对抗体进一步纯化,利用SDS-PAGE分析抗体的纯度,间接ELISA法检测抗体的效价和特异性,Bradford法检测抗体的蛋白含量,并利用生物素对抗体进行标记.结果 制备的牛种布鲁菌544A的兔多克隆抗体纯度较高,效价为1∶256 000,特异性较好,蛋白含量为2.83 mg/ml,每摩尔蛋白中标记的生物素摩尔数为3.09.结论 成功制备了生物素标记的牛种布鲁菌多克隆抗体,为下一步研制牛种布鲁菌免疫检测试剂盒奠定了物质基础.
布鲁菌、多克隆抗体、免疫检测
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R378.5;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
国家自然科学基金面上项目81072337,81473018;国家自然科学基金青年基金项目81401721;吉林大学“大学生创新创业训练计划”项目2014A72317.
2015-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
147-150,154
