复合模式介质Capto core 700纯化轮状病毒

摘要：

目的 采用复合模式介质Capto core 700纯化轮状病毒(rotavirus,RV),去除培养液中的残余细胞宿主蛋白和DNA,提高病毒收率.方法 将RV LH9毒种接种Vero细胞,制备RV原液,澄清、超滤后,用Capto core 700纯化:样品LH9、LH9+150 mmol/L NaCl[以缓冲液A(20 mmol/L PB+150 mmol/L NaCl,pH 7.0)作为缓冲液]上样纯化分别标记为A、B组合,样品LH9+ 300 mmol/L NaCl[以缓冲液B(20mmol/L PB+ 300 mmol/L NaCl,pH 7.0)作为缓冲液]上样纯化标记为C组合,样品LH9+450 mmol/L NaCl[以缓冲液C(20 mmol/L PB+450 mmol/LNaCl,pH 7.0)作为缓冲液]上样纯化标记为D组合,洗脱,收集流穿峰,检测纯化后病毒的滴度和收率、RV RNA、RV抗原性、残余宿主细胞蛋白(HCP)和DNA;并用初步筛选出的纯化组合纯化3批RV超滤浓缩液,检测各项指标,进行进一步验证.结果 用20 mmol/L PB+150 mmol/L NaCL缓冲体系和样品中加入150 mmol/L NaCl的组合纯化RV,病毒收率在80％以上,病毒核酸完整,其抗原性未发生改变,可去除94％以上的HCP,残余DNA符合《中国药典》三部(2010版)标准.结论 Capto core 700纯化RV收率和残余蛋白去除效率均较高,组合B操作相对简便,工艺时间短,病毒收率高,更适于RV的纯化.

关键词：Capto core 700、纯化、轮状病毒

所属期刊栏目：28

分类号：R392-33;R373.2

在线出版日期：2015-03-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：72-78