人周期素依赖性激酶10真核表达质粒的构建及鉴定
目的 构建人周期素依赖性激酶10(cyclin-dependent kinase 10,CDK10)真核表达质粒,并进行鉴定.方法 采用RT-PCR法从人鼻咽癌细胞株HNE1中扩增CDK10基因全长编码区序列,克隆人真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组表达质粒pcDNA-CDK10,转染人鼻咽癌细胞株CNE-2,采用Western blot法检测转染细胞中CDK10蛋白的表达水平.结果 重组真核表达质粒pcDNA-CDK10经双酶切及测序证实构建正确;经800μg/ml的G418筛选2周后,获得过表达CDK10的稳定转染细胞系CDK10c1和CDK10c2;与空载体转染对照组相比,CDK10c1和CDK10c2细胞中CDK10蛋白的表达量均显著升高(P均＜0.05).结论 成功构建了人CDK10真核表达质粒.
人周期素依赖性激酶10、真核细胞、基因表达、鼻咽癌
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Q556;Q782(酶)
河南省科技攻关计划项目142102310464;漯河医学高等专科学校自然科学项目2013,Y-J You.
2015-03-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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