呼吸道合胞病毒F1蛋白截短体(F212-489)的原核表达及纯化
目的 原核表达并纯化呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)F1蛋白截短体(F212-489).方法 从质粒pMD-18T-f中PCR扩增截短f1基因(f212-489),经TA克隆测序正确后,将目的片段插入原核表达载体pET-28a,构建重组表达质粒pET-28a-f212.489,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达.表达的重组蛋白经镍离子亲和层析纯化后,进行Western blot鉴定.结果 重组表达质粒pET-28a-f212-489经双酶切鉴定构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为30 000,主要以包涵体形式表达,表达量约占菌体总蛋白的10％;纯化的重组蛋白纯度为85％,可与羊抗RSV多克隆抗体特异性结合.结论 成功表达了RSV F1蛋白截短体(F212-489),纯化的重组蛋白反应原性良好,为更好地研究RSV的免疫机理及通过基因工程方法研制特定部位的亚单位或多肽疫苗奠定了基础.
呼吸道合胞病毒、F蛋白、截短蛋白、原核细胞、基因表达、纯化
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R373.1;Q786(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
国家自然科学基金项目31160193;云南省教育厅科学研究基金项目2010Y398;云南省应用基础研究面上项目2010ZC055,2012FB135.
2015-03-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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