微载体规模化培养Vero细胞制备肠道病毒71型灭活疫苗及其免疫原性分析

摘要：

目的 利用微载体规模化培养Vero细胞制备肠道病毒71型(enterovirus type 71,EV71)灭活疫苗,并检测其免疫原性.方法 利用免疫荧光法检测从患手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)伴发重症脑炎患儿粪便样本中分离鉴定的EV71毒株KC414134的特异性;用微载体规模化培养Vero细胞制备KC414134,50 KD超滤膜过滤,蔗糖密度梯度离心纯化病毒,经β-丙内酯灭活后,与氢氧化铝佐剂混合,制备灭活疫苗,经皮下免疫昆明小鼠3次,末次免疫后1周检测血清中总抗体和中和抗体效价.结果 特异性荧光分布在细胞质中,表明分离的KC414134为EV71.微载体规模化培养Vero细胞制备得到大量病毒,纯化后未获得理想纯度的病毒颗粒,但病毒灭活完全;灭活疫苗免疫小鼠后,获得了较高效价的总抗体和中和抗体.结论 利用微载体规模化培养Vero细胞成功制备了具有较高免疫原性的EV71灭活疫苗,为后期灭活疫苗的开发奠定了基础.

关键词：肠道病毒71型、微载体、Vero细胞、灭活疫苗、免疫原性

所属期刊栏目：28

分类号：R373.2;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2015-03-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：14-16,20