人α1微球蛋白ELISA检测试剂盒的制备及初步应用
目的 制备人α1微球蛋白(alpha l-mieroglobulin,α1-MG)ELISA定量检测试剂盒,并初步应用于临床标本的检测.方法 用重组人α1-MG蛋白免疫小鼠,采用杂交瘤技术制备特异性单克隆抗体,对单抗的特性进行鉴定后,采用双抗体夹心ELISA方法制备α1-MG试剂盒,并进行线性范围、灵敏度、准确性、精密性验证.应用制备的试剂盒检测100份健康人血清中的α1-MG含量,计算正常参考值;分别应用试剂盒及放射性免疫分析法(radioactive immunoassay, RIA)检测87份人血清标本,分析试剂盒与RIA法检测结果的相关性.结果 经间接ELISA法筛选及克隆化培养,共获得4株稳定分泌抗α1-MG单抗的杂交瘤细胞株;制备的试剂盒最佳线性范围为0.5～60 mg/L,灵敏度为0.03 mg/L,检测不同浓度α1-MG的回收率在92.7％～97.1％之间,批内、批间变异系数(CV)分别为4.78％ ～8.57％和4.30％～6.84％;该试剂盒检测健康人血清样本中α1-MG含量正常参考值为15 ～ 32 mg/L,与RIA法的检测结果具有良好的相关性(r=0.958 6).结论 制备的人α1-MG ELISA检测试剂盒具有较高的准确性和灵敏度,且与RIA法具有良好的相关性,符合临床免疫分析的要求,适用于临床检测和科研应用.
α1微球蛋白、酶联免疫吸附测定、试剂盒、参考值
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R692;R446.61(泌尿科学（泌尿生殖系疾病）)
吉林省科技厅科技发展计划项目20130102085jc;吉林省卫生厅自然科学基金2012Z078.
2015-03-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1560-1564
