带状疱疹疫苗生产中2BS细胞细胞工厂培养工艺的建立

摘要：

目的 建立带状疱疹疫苗生产中2BS细胞在细胞工厂中的培养工艺.方法 将2BS细胞复苏(28代)后,连续传代至35、36代,再分别按1∶4、1∶2比例传至10层细胞工厂中,采用不同的加液量(200、300、400 ml/层)进行培养,显微镜下观察细胞形态,并进行细胞计数.取细胞工厂,按MOI 0.008接种水痘-带状疱疹病毒,制备成带状疱疹减毒活疫苗,检测疫苗原液及成品的滴度;疫苗成品进行37℃稳定性试验;采用酶联免疫法检测抗生素残留量和牛血清白蛋白残留量;凝胶法检测内毒素含量;水分容量滴定法检测水分含量.结果 2BS细胞按1∶2比例传代,细胞工厂单层加液量为300 ml,可制备单层致密、优质的细胞,细胞工厂收获时细胞病变达80％以上,且病变细胞圆润、典型、广泛,细胞形态保持较好;传代比例为1∶4的细胞制备的疫苗原液及成品的滴度明显低于传代比例为1∶2的细胞制备的疫苗,且1∶4传代的细胞制备的疫苗成品37℃豫定性滴度不符合带状疱疹疫苗放置1周病毒滴度不小于4.6 lgPFU/ml的质量标准;其他各项质量指标均符合要求.结论 建立了带状疱疹疫苗生产中2BS细胞在细胞工厂中的培养工艺,利用细胞工厂可制备出质量均一、致密优质的2BS细胞.

关键词：带状疱疹疫苗、2BS细胞、细胞工厂

所属期刊栏目：27

分类号：R373.1+1;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2015-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1485-1487,1492