流感病毒裂解工艺的优化
目的 探讨影响流感病毒裂解的因素,优化流感病毒裂解工艺.方法 分别在不同裂解时间(TritonX-100裂解1、2、3和4h)、不同终浓度的裂解剂(终浓度为0.5%、0.6%、0.7%和0.8%的TritonX-100)、不同总蛋白浓度(2 000、3 000和4 000 μg/ml)及不同的离子强度[终浓度为0.01、0.05、0.1和0.5 mol/L的PBS(pH 7.2)]下,对流感病毒进行裂解,电镜下观察病毒裂解效果,同时采用免疫单扩散法检测血凝素含量,Lowry法检测总蛋白含量,计算蛋白含量/血凝素含量比值(裂解后病毒纯度)及血凝素回收率,确定最佳裂解工艺参数.结果 当裂解前病毒纯化液蛋白含量范围为2 000 ~3 000 μg/ml,PBS终浓度为0.1 mol/L时,利用终浓度为0.7%~0.8%的Tfton X-100裂解流感病毒2h,可获得最佳裂解效果.结论 确定了流感病毒最佳裂解参数,优化了流感病毒裂解疫苗生产中的裂解工艺.
流感病毒、Triton X-100、裂解工艺、优化
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R373.1+3;R392-33(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家科技重大专项2012ZX09201301-006;吉林省医药产业发展专项资金YYZX201112.
2015-01-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1454-1458,1462