人血清中A、C、Y、W135群脑膜炎球菌荚膜多糖IgG抗体含量ELISA检测方法的建立
目的 建立人血清中抗A、C、Y、W135群脑膜炎球菌荚膜多糖IgG抗体含量的ELISA定量检测方法,并进行验证.方法 筛选适用的酶标板,优化抗原包被浓度,确定ELISA检测过程的关键条件,对建立的EHSA方法的特异性、线性、准确性、精密度、最低检测值和稳定性进行验证,并建立实验室质控血清的质控检测范围.结果 酶标板的板内CV为9.8％,板间CV为16.4％,符合检测使用要求.免疫血清经多糖吸收后,群特异性抗体含量与同群多糖吸收剂量呈明显的剂量依赖关系.12份美国CDC质控血清中各群IgG抗体含量与血清的稀释度呈负相关,相关系数(r)和斜率(slope)均接近-1,线性关系良好;检测结果与CDC公布数据一致性良好,一致性相关系数A、C、W135、Y群分别为0.912 5、0.939 6、0.963 7和0.9206,准确度较好.实验室内部质控血清Men20中各群IgG抗体含量试验内和试验间精密度分别小于10％和20％,精密度较好;各血清群别的CV值均＜30％,稳定性较好;A、C、Y、W135群多糖IgG抗体含量最低检测值分别为0.092、0.118、0.067和0.035 μg/ml,质控血清的检测范围分别为:92.49～36.53、37.29～17.69、66.18 ～ 25.54和50.15 ～ 23.31 μg/ml.结论 建立了标准化的检测人血清中抗A、C、Y、W135群脑膜炎球菌多糖IgG抗体含量的定量ELISA方法,并确定了实验室日常用质控血清Men20的质控检测值范围.
脑膜炎球菌、荚膜多糖、抗体、酶联免疫吸附试验
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R378.1+5;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
国家科技支撑计划课题2008BAI66B01;国家“重大新药创制”专项2013ZX09402-302-215;甘肃省科技重大专项0801NKDA003;甘肃省“十二五陇药产业发展”专项.
2015-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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