C群脑膜炎球菌家兔免疫血清的制备及其群特异性和相关方法专属性分析
目的 制备C群脑膜炎球菌家兔免疫血清,并进行群特异性和相关方法专属性分析.方法 用制备的C群脑膜炎球菌菌液免疫青紫兰家兔,经耳缘静脉注射8×109个/ml菌液,0.5～1.0ml/只,每周l、3、5免疫,共免疫4周,于第6周开始加强免疫,每周2次,连续3周,于末次免疫1周后,经颈动脉采血,分离血清,采用免疫双扩散法检测血清效价.采用ELISA、Western blot及火箭免疫电泳法分析其群特异性和相应方法专属性.结果 建立了家兔免疫血清制备方法,制备的3份(①、②、③)免疫血清相应多糖抗体效价分别为1∶8、1∶8和1∶16.自制免疫血清①、③在使用工作浓度下,符合免疫学质量控制ELISA方法的特异性和专属性要求.自制免疫血清③可作为C群脑膜炎球菌结合物Western blot检测的Anti-PS血清,在该检测灵敏度下可完全达到与破伤风类毒素(Tr)无交叉反应;血清①、②的轻微交叉反应可通过相应抗原预吸收血清消除,从而达到结合物Western blot检测的Anti-PS使用要求.自制3份免疫血清均可用于火箭免疫电泳分析.结论 自制的家兔免疫血清可替代商品诊断血清,并达到了ELISA、Western blot及火箭免疫电泳法群特异性和相应方法专属性要求,可用于对C群脑膜炎球菌结合物制备过程的多糖抗原性分析及结合疫苗质量控制.
脑膜炎球菌、免疫血清、特异性、专属性
27
R378.1+5;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
国家“重大新药创制”专项2013ZX09402-302-215;甘肃省科技重大专项0801NKDA003;甘肃省“十二五陇药产业发展”专项.
2015-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
1421-1425,1432
