人二倍体细胞(2BS株)细胞库的建立及生物学特性鉴定
目的 建立人二倍体细胞(2BS株)主细胞库和工作细胞库.方法 将人二倍体细胞(2BS株)扩大培养后冻存,建立主细胞库和工作细胞库,采用台盼蓝染色计数细胞,计算细胞活力,并进行染色体、外源病毒因子、微生物污染、致瘤性的检测及鉴别试验.将全面检定合格的工作细胞库细胞分别接种至T75一次性培养瓶、3L玻璃转瓶和10层细胞工厂,观察细胞形态;将水痘病毒分别按0.010 5、0.012 8、0.018 8 MOI接种至T75一次性培养瓶、3L玻璃转瓶和10层细胞工厂上的单层细胞,收获病毒原液,检测病毒滴度.结果 主细胞库细胞活力为94.1％,工作细胞库细胞活力为94.4％;1 000个处于分裂相时期的细胞的核型分析结果均在《中国药典》三部(2010版)人二倍体细胞染色体分析标准的规定范围内;细胞上清液和裂解液中人外源病毒因子检测结果均为阴性,符合《中国药典》三部(2010版)规程要求;细胞均贴壁,成纤维细胞形态,种属鉴别为人细胞B型;细胞库未被细菌、真菌、病毒及支原体污染,也未出现致瘤性.建立的细胞库在3种培养器皿中均可在工艺要求时间内生长为单层,单位面积活细胞浓度在(2.01～2.59)× 105个/cm2之间,收获的病毒滴度在5.0 ～ 5.25 lgPFU/ml之间,符合成都生物制品研究所有限责任公司《水痘减毒活疫苗制造及检定规程》要求.结论 建立了人二倍体细胞(2BS株)主细胞库和工作细胞库,为2BS细胞应用于水痘减毒活疫苗的研发和生产提供细胞资源和理论依据.
人二倍体细胞(2BS株)、细胞库、生物学特性
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R392-33
2015-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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