Vero细胞培养轮状病毒关键条件的优化

摘要：

目的 优化轮状病毒基因重配株(UD株)在Vero细胞上培养的关键条件.方法 将轮状病毒基因重配株(UD株)分别以0.01、0.03、0.05和0.10 MOI接种Vero细胞,分别于接种病毒后6、12、24、36、48、72、84、96、108、120 h取样,观察细胞病变(CPE)情况,计算半数感染剂量(CCID50/ml).以0.05 MOI接种Vero细胞,分别加入含1、2、3、5、8和10 μg/ml胰蛋白酶的M199培养液,于接种病毒后12～ 48 h,观察CPE情况,检测病毒滴度.结果 以0.05 MOI接种Vero细胞后,维持液中胰蛋白酶浓度为5μg/ml,培养时间为48 h时,滴度达到最高,为6.5 lgCCID50/ml,且对Vero细胞的分裂增殖无不良影响.结论 通过对Vero细胞培养轮状病毒关键条件的优化,获得了提高病毒滴度的有效方法,为使用Vero细胞培养轮状病毒制备轮状病毒减毒活疫苗奠定了基础.

关键词：Vero细胞、轮状病毒、培养、优化

所属期刊栏目：27

分类号：R392-33

资助基金：国家国际科技合作项目S2011GR0391.

在线出版日期：2014-12-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1345-1347