酶标板法检测甘油三酯净含量方法的优化、验证及其在人血白蛋白层析纯化工艺中的应用

摘要：

目的 优化酶标板法检测甘油三酯(triglyceride,TG)净含量的方法,进行验证,并将其应用于监测人血白蛋白层析纯化工艺中样品的脂类含量,对工艺优化提供指导.方法 建立酶标板上快速检测TG含量方法,通过两步酶反应的吸光度值的差值计算TG净含量.确立该方法的标准曲线范围,并进行准确度和精密度进行验证.采用该方法监测层析工艺中样品的TG净含量,优化人血白蛋白层析纯化工艺.结果 该方法检测TG的线性范围在78～2 500 μg/ml之间,游离甘油(free glycerin,FG)的线性范围在8.13～ 260 μg/ml之间,R2均为0.997.各样品检测结果CV均＜4％,回收率在102％～ 107％之间,准确度较好;同一样品由同一个实验员在同一试验中连续测定6次和由不同的实验员在不同日期内分别测定3次的结果,CV均＜3％,精密度较好.在人血白蛋白层析纯化工艺中采用去脂剂可将白蛋白样品中的残余脂类去除.结论 优化后的甘油三酯净含量检测方法为人血白蛋白层析纯化工艺的优化提供了指导,在血液制品工艺研发过程中具有重要的应用价值.

关键词：酶标板法、血浆蛋白、甘油三酯、含量测定、去脂剂

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分类号：Q599

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2012AA021904;2013年湖北省重大科技创新计划2013ACC001.

在线出版日期：2014-12-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1325-1329