冻干ACYW135群脑膜炎球菌多糖结合疫苗中各群多糖含量检测方法的建立及验证

摘要：

目的 建立冻干ACYW135群脑膜炎球菌多糖结合疫苗中多糖含量的测定方法.方法 将10支ACYW135群脑膜炎球菌多糖结合疫苗用注射用水复溶后,分为10份,70μl/份,依次加入20 mg/ml蛋白酶K溶液0、l、2、3、4、5、6、7、8、9μl,降解结合物中载体蛋白,采用火箭免疫电泳法进行多糖含量的测定,确定蛋白酶K最适加量.对建立的方法进行线性范围、定量限度确定以及准确度、精密性及专属性验证.结果 20 mg/ml蛋白酶K的最适加量为5μl;该方法的线性范围为2.5～40 μg/ml,定量限度为2.5μg/ml;3个不同浓度的供试品重复测定3次,A、C、Y、W135群多糖含量的平均回收率分别为99.1％、96.5％、96.5％和97.4％;不同试验人员在不同时间对同一供试品重复测定9次,A、C、Y、W135群多糖含量的CV值分别为3.40％、4.11％、3.35％和4.88％;各群多糖抗原均与其对应的抗血清产生免疫沉淀,而与其他群抗血清不产生免疫沉淀,具有较强的特异性.结论 建立了冻干ACYW135群脑膜炎球菌多糖结合疫苗中多糖含量的检测方法,该方法在确定的限度范围内具有较好的准确度、精密性及专属性.

关键词：脑膜炎球菌、多糖、结合疫苗、含量测定

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分类号：R378.1+1;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：云南省科技计划项目2014AE009.

在线出版日期：2014-10-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1092-1096