呋喃唑酮代谢物单克隆抗体及其新型免疫层析检测试纸条的制备

摘要：

目的 制备呋喃唑酮代谢物AOZ单克隆抗体及其胶体金与荧光淬灭免疫层析试纸条.方法 将AOZ衍生成CPAOZ后,与载体蛋白BSA偶联,制备完全抗原CPAOZ-BSA,经皮下多点注射免疫BALB/c小鼠,共5次,取小鼠睥细胞与SP2/0细胞融合,获得稳定分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株.利用获得的抗CPAOZ单克隆抗体制备胶体金及荧光淬灭免疫层析试纸条,并对试纸条的灵敏度及特异性进行验证.结果 制备的完全抗原经紫外扫描鉴定偶联成功.共获得3株能稳定分泌抗CPAOZ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中效价和特异性最好的1株2H11针对CPAOZ的50％抑制质量浓度(IC50)为0.88 ppb.以该抗体制备的胶体金及荧光淬灭免疫层析试纸条的最低检测限分别为7.5和0.062 5 ppb;两种试纸条与其他3种硝基呋喃类代谢物CPAMOZ、CPAHD、CPSEM均不存在交叉反应.结论 成功制备了抗CPAOZ单抗及其胶体金免疫层析和荧光淬灭免疫层析试纸条,两种试纸条均具有较高的灵敏度和较强的特异性,其中荧光淬灭免疫层析试纸条的灵敏度较胶体金免疫层析试纸条高约100倍,具有良好的应用前景.

关键词：呋喃唑酮、代谢物、单克隆抗体、胶体金、荧光、免疫层析、试纸条

所属期刊栏目：27

分类号：R392-33

资助基金：第47批教育部留学归国人员科研启动基金.

在线出版日期：2014-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：927-931