人源化抗CD20单克隆抗体的理化性质及结晶条件的筛选
目的 分析人源化抗CD20单克隆抗体的理化性质,并初步筛选其结晶条件.方法 分别采用还原、非还原SDS-PAGE及高效液相体积排阻色谱(size exclusive chromatography-HPLC,SEC-HPLC)法检测抗体纯度;还原SDS-PAGE测定抗体轻重链相对分子质量;毛细管电泳测定抗体等电点;高效液相阳离子交换色谱(ion exchange chromatographyHPLC,IEC-HPLC)法检测抗体电荷异质体含量;悬滴气相扩散法初步筛选抗体的结晶条件.结果 人源化抗CD20单克隆抗体的非丕原SDS-PAGE纯度为100%,还原SDS-PAGE纯度(轻链+重链)为100%,重链、轻链相对分子质量分别为58 000和27 000,SFC-HPLC纯度为99.2%;等电点为9.2;抗体表面电荷分布较均一;得到的蛋白晶体为孪晶,分辨率约为8埃.结论 该抗体的纯度达到结晶要求,以其理化性质为基础,初步筛选出了结晶条件,为其结构和功能的研究奠定了基础.
人源化抗体、单克隆抗体、CD20、纯度、理化性质、结晶
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R392-33;O782
2014-06-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
657-660