一种可用于大规模单克隆抗体纯化的新型Protein A填料

摘要：

目的 比较不同型号Protein A填料的性能,筛选合适的Protein A填料,用于大规模单克隆抗体(简称单抗)纯化.方法 采用表达H02单抗的CHO细胞培养上清,测试不同供应商Protein A填料的蛋白结合载量,选择合适的填料,用于大规模单抗纯化;检测宿主细胞蛋白(host cell protein,HCP)、外源DNA及Protein A残留量,以评价其纯化效果;检测Protein A柱在位清洗(cleaning in place,CIP)效果,并验证其循环使用次数.结果 Amsphere Protein A JWT203填料为合适的ProteinA填料,H02单抗大规模纯化后,可有效去除HCP、DNA及脱落Protein A;采用0.1 mol/LNaOH进行CIP,经过300个循环,对H02单抗仍保持80％以上动态结合载量,Protein A脱落无明显增加,对HCP、外源DNA、聚合体的去除能力无明显改变,层析图谱与初始基本一致,Amsphere Protein A JWT203填料的理化性质较稳定.结论 AmsphereProtein A JWT203是一种可用于大规模单抗纯化的新型Protein A填料.

关键词：抗体,单克隆、纯化、Protein A填料

所属期刊栏目：27

分类号：O657.7+3;R392-33(分析化学)

资助基金：国家科技部重大新药创制科技重大专项2011ZX09102-001-27;上海市科委重点科技攻关项目11431920104

在线出版日期：2014-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：228-234