癌基因c-myc对食管癌BubR1的调控
目的 探讨癌基因c-myc对食管癌有丝分裂检查点效应蛋白BubR1的调控作用.方法 将Bub1b基因启动子亚克隆至载体pSEAP2-Basic中,构建重组质粒pSEAP2-Bub1b-P2000,在Lipofectamine 2000的介导下,分别转染过表达c-myc的HEK-293细胞(经Ad-c-myc感染)和ECA-109细胞;转染6h后,经c-myc抑制剂10058-F4作用ECA-109细胞.SEAP化学发光法检测各组细胞的ALP活性;采用RT-PCR和Western blot法分别检测抑制c-myc表达的ECA-109细胞中Bub1b基因mRNA转录和BubR1蛋白的表达水平.结果 重组质粒经PCR、双酶切及测序鉴定构建正确;重组质粒转染过表达c-myc的HEK-293细胞和抑制c-myc表达ECA-109细胞的ALP活性明显升高(P<0.000 1);抑制c-myc表达可明显下调ECA-109细胞中Bub1b基因mRNA转录和BubR1蛋白的表达水平(P<0.05).结论 癌基因c-myc对食管癌细胞中BubR1的表达有正调控作用,为进一步研究BubR1在食管癌中发挥的作用奠定了基础.
c-myc基因、有丝分裂检查点、BubR1蛋白、食管癌
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R735.1(肿瘤学)
国家自然科学基金资助项目30872770;教育部高等学校博士学科点专项科研基金20115503110009
2014-02-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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