生物反应器培养分泌重组人干扰素β 1a的CHO细胞工艺的建立
目的 建立生物反应器培养分泌重组人干扰素β1a(IFNβ1a)的CHO细胞的工艺,探讨CHO细胞表达分泌IFNβ1a的反应动力学规律.方法 应用15L生物反应器悬浮微载体方式培养CHO工程细胞,比较不同时期细胞的生长形态、数量、生物活性、灌流量、葡萄糖消耗量及其他物理参数的变化规律.结果 15L生物反应器中在初始pH 6.86~7.20,溶氧30%~ 70%,温度36.8 ~ 37.2℃,微载体4 g/L,罐流量6.5 L/h的条件下连续培养40 d,CHO工程细胞的密度维持在5×105个/ml之间,收获的细胞液中重组人IFNβ1a的生物活性为2.5×104~4.0×105 IU/ml,葡萄糖消耗量在0.5~2.5 mg/ml之间.结论 初步建立了15 L生物反应器培养分泌重组人IFNβ1a的CHO细胞的工艺,为进一步建立工业化生产工艺奠定了基础.
生物反应器、微载体、中国仓鼠卵巢细胞、干扰素β1a、无血清培养基
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Q511;R392-33(蛋白质)
广东省教育部产学研结合项目2012B091100408;深圳市科技创新委资助项目2112K3070011,JAS2009032012-00A
2013-11-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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