朊病毒病相关miRNA在不同发病脏器和细胞中表达的变化

摘要：

目的 利用Real-time PCR法检测朊病毒病相关miRNA在不同发病脏器和细胞中的表达变化.方法 提取羊痒病因子22L毒株感染的BALB/c小鼠大脑、海马、延髓、脾脏以及羊痒病因子22L毒株感染的鼠神经瘤ScN2a细胞总RNA,通过特殊设计的茎环结构的反转录引物进行反转录,应用ABI step one plus system定量PCR仪进行定量检测;对Real-time PCR进行特异性和重复性验证;采用SYBR Green荧光染料法,以U6 RNA作为内参照,2-△△Q法进行miRNA表达相对定量分析,检测小鼠发病脏器中和细胞中miR-7a、miR-128、miR-135a、miR-146a、miR-152、miR-24-2*、miR-380-3p、miR-448-5p的表达.结果 Real-time PCR法检测朊病毒病相关miRNA特异性和重复性良好.各组中miRNA改变5倍以上的有发病终末期小鼠大脑中的miR-146a,海马中的miR-128、miR-135a、miR-152,延髓中的miR-448-5p,ScN2a细胞中的miR-146a,脾脏中的miR-152,其中脾脏中的miR-152显著上调,为18.98倍.结论 朊病毒病中这些上调或下调的miRNA能调控细胞内多种代谢和信号传导途径发生异常,引起细胞及组织器官发生病理学变化.

关键词：朊病毒病、微RNA、Real-time PCR

所属期刊栏目：26

分类号：R373.9;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31072148,31101782,31201714;吉林省科技发展计划项目201215096

在线出版日期：2013-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1434-1439,1444