重组人锰超氧化物歧化酶的胃蛋白酶酶解特性及其稳定性

摘要：

目的 探讨重组人锰超氧化物歧化酶(rhMn-SOD)的胃蛋白酶酶解特性及其稳定性.方法 在37℃条件下,用模拟胃液(0.084 mol/L HCl,35 mmol/L NaCl,pH 2.0,4 000 U胃蛋白酶)处理rhMn-SOD不同时间,SDS-PAGE分析酶解效果;使用总SOD测定试剂盒检测rhMn-SOD在不同温度(25、37、45、55、65、75℃)下保存不同时间(10、20、30、40、50、60 min)、不同pH(4.0～10.0)、不同化合物(氯仿、甘油、DMSO、10％ SDS、β-巯基乙醇、苯酚、30％H2O2)处理后及日光和紫外照射后的相对活力.结果 rhMn-SOD在模拟胃液中处理2 min即可完全酶解.在25～55℃范围内,rhMn-SOD具有较好的热稳定性,在65～ 75 ℃范围内,rhMn-SOD的热稳定性较差;在pH6.0～8.0范围内,rhMn-SOD具有较好的稳定性;rhMn-SOD对甘油和氯仿不敏感,经DMSO、SDS处理后,活力大幅下降,经β-巯基乙醇、苯酚、30％ H2O2处理后,基本失活;rhMn-SOD经日光和紫外照射3h,活力基本不变.结论 分析了rhMn-SOD的胃蛋白酶酶解特性、热稳定性、pH稳定性、对不同化合物的敏感性以及光稳定性,为其广泛应用于化妆品、药品、食品添加剂等领域奠定了基础.

关键词：超氧化物歧化酶、胃蛋白酶、蛋白酶解、稳定性、酶活力

所属期刊栏目：26

分类号：Q554+.6;R392-33(酶)

资助基金：广东省教育厅科技创新项目2012KJCX0017

在线出版日期：2013-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1426-1429