牛种布鲁菌VirB12蛋白的原核表达及纯化
目的 原核表达并纯化牛种布鲁菌(Brucella) VirB 12蛋白.方法 利用PCR法从牛种布鲁菌基因组中扩增VirB 12基因,插入pET-30a(+)载体,构建重组表达质粒pETV12,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达.表达的重组蛋白经组氨酸结合树脂柱纯化后,进行SDS-PAGE及Western blot分析.结果 重组表达质粒pETV12经双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约22 000,纯化的重组蛋白纯度达94%,可被布鲁菌免疫兔血清特异性识别.结论 原核表达并纯化了牛种布鲁菌VirB12蛋白,为进一步研究VirB 12蛋白的结构、功能及相关疫苗的研制奠定了基础.
布鲁菌、VirB 12基因、原核细胞、基因表达
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R378.5+2;Q786(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
辽宁省教育厅科学研究一般项目L2012306;辽宁医学院横向课题LYHX2012076;辽宁省科技厅自然科学基金联合基金项目2013022041
2013-09-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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