缺氧诱导因子-1α与Wnt/β-catenin信号通路在缺氧胃癌细胞中的相互作用
目的 在缺氧环境下,探讨缺氧诱导因子-1α(Hypoxia-inducible factor-lα,HIF-1α)与Wnt/β-catenin信号通路在胃癌细胞SGC-7901中的相互作用.方法 将质粒β-catenin-micRNA转染SGC-7091细胞,筛选稳定转染细胞株SGC-7901-β-catenin-micRNA.将SGC-7901细胞分为对照组、脂质体组和阴性对照组,对照组:常氧培养48 h;脂质体组:常氧培养24 h后,加入10μl脂质体,培养24 h;阴性对照组:常氧培养24 h后,转染阴性对照质粒,培养24 h;设稳定转染细胞株为干扰组,常氧培养48 h.采用倍增时间试验、平板克隆形成试验及流式细胞术检测各组细胞倍增时间、平板克隆集落数及细胞周期的变化.另取SGC-7901细胞,分为对照组、缺氧组、双重缺氧组;对照组:常氧培养48 h;缺氧组:常氧培养32 h,物理缺氧培养16 h;双重缺氧组:常氧培养24 h,化学缺氧培养8h后,再同时物理缺氧培养16h.同时取稳定转染细胞株,分为对照干扰组、缺氧干扰组和双重缺氧干扰组.对照干扰组:常氧培养48 h;缺氧干扰组:常氧培养32 h,物理缺氧培养16 h;双重缺氧干扰组:常氧培养24 h,化学缺氧培养8h后,再同时物理缺氧培养16h.采用RT-PCR和Western blot法检测各组细胞中HIF-1α、β-catenin的mRNA及蛋白的表达水平.结果 与对照组、脂质体组、阴性对照组比较,干扰组倍增时间延长,平板克隆集落数减少,细胞阻滞在G1期比例增加,S期减少,差异均有统计学意义(p＜0.05).缺氧组与对照组、双重缺氧组与缺氧组、缺氧干扰组与对照干扰组及双重缺氧干扰组与缺氧干扰组相比,HIF-1α、β-catenin的mRNA及蛋白表达水平均升高,差异有统计学意义(P均＜0.05).缺氧干扰组与缺氧组及双重缺氧干扰组与双重缺氧组比较,β-catenin、HIF-1α的mRNA及蛋白表达水平均降低,差异有统计学意义(P均＜0.05).结论 HIF-1α激活可调控Wnt/β-catenin通路,但也受控于Wnt/β-catenin通路,二者之间相互影响,相互调节.
缺氧诱导因子、Wnt/β-catenin、RNA干扰、胃癌
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R373.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
2013-07-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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