人胎盘泌乳素的原核表达及纯化
目的 原核表达并纯化人胎盘泌乳素(Human placenta lactogen,hPL).方法 从正常产妇新鲜胎盘组织中提取组织总RNA,PCR扩增hPL基因,将其亚克隆至pQE-30载体,构建重组表达质粒,转化感受态大肠杆菌M15(pREP4),经IPTG诱导表达.表达产物经Sephacryl S-200层析柱纯化,纯化产物经SDS-PAGE和western blot鉴定其纯度和特异性.结果 重组菌pQE-hPL/M15(pREP4)经双酶切及测序证实构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约23 000,主要以包涵体形式表达,表达量占菌体总蛋白的67％;纯化后目的蛋白纯度可达90％以上;纯化蛋白和hPL包涵体均可与羊抗hPL多克隆抗体特异性结合,具有较强的特异性和抗原性.结论 已成功制备了纯度较高的hPL蛋白,为基因工程制备抗体提供了抗原.
人胎盘泌乳素、原核细胞、基因表达、纯化
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Q575+.13;Q786(激素)
吉林省科技计划项目20110962
2013-07-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共4页
661-663,669
