PML(NLS-)干扰对HL-60细胞增殖与凋亡的影响
目的 探讨缺失核定位信号的PML,即PML(NLS-)干扰对急性早幼粒细胞白血病细胞HL-60增殖与凋亡的影响.方法 将靶向PML(NLS-)基因的3组干扰质粒pGpu6-PML(NLS-)shRNA和阴性对照质粒pGpu6-NCshRNA分别转染HL-60细胞,转染后48 h,G418筛选阳性克隆,分别命名为Si-1、Si-2、Si-3和NC组,并设空白对照组.采用RT-PCR法和Western blot法检测各组细胞中PML (NLS-)基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平；MTT法检测细胞的增殖活力；流式细胞术分析细胞的细胞周期及凋亡情况.结果 Si-1和Si-2组HL-60细胞PML (NLS-)基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平与空白对照组相比明显减低(P＜0.05),有干扰效果；Si-1组HL-60细胞的增殖水平与空白对照组相比明显降低(P＜0.05),以转染后48 h降低最为显著(P＜0.01)；抑制PML(NLS-)表达可引起HL-60细胞S期比例增高,G1和G2期比例下降(P＜0.05);Si-1组细胞凋亡率明显高于NC组和空白对照组(P＜0.05).结论 干扰PML(NLS-)的表达可促进HL-60细胞的凋亡,抑制其增殖.
PML(NLS)基因、RNA干扰、HL-60细胞、细胞增殖、细胞凋亡
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Q253(细胞生理学)
国家自然科学基金81171658;重庆市自然科学基金计划重点项目2011BA5037
2013-05-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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