呼吸道合胞病毒F2蛋白与结核分枝杆菌早期分泌抗原靶6蛋白的融合表达及纯化

摘要：

目的 在大肠杆菌中融合表达呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)F2蛋白与结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)早期分泌抗原靶6(Early secretory antigenic target-6,ESAT-6)蛋白,并进行纯化.方法 分别从MTB标准菌株H37Rv及含F蛋白全长基因的pMD18-T-f质粒中扩增esat-6-f2基因,插入原核表达载体pET-30a中,构建重组表达质粒pET-30a-esat-6-f2,转化大肠杆菌BL21 (DE3),IPTG诱导表达,表达的融合蛋白经SDS-PAGE和Western blot鉴定后,经镍离子亲和层析柱纯化.结果 重组表达质粒经双酶切及测序鉴定,证明构建正确；重组融合蛋白ESAT-6-F2相对分子质量约为21 000,主要以包涵体形式表达,可与小鼠抗His单克隆抗体特异性结合；纯化的融合蛋白纯度可达90％以上.结论 成功在大肠杆菌中表达并纯化了重组融合蛋白ESAT-6-F2,为进一步研究其免疫原性和免疫保护性奠定了基础.

关键词：呼吸道合胞病毒、F2蛋白、分枝杆菌,结核、早期分泌抗原靶6蛋白、融合蛋白、表达、纯化

所属期刊栏目：26

分类号：R373.1;R378.91+1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金项目30872398,31160193;云南省应用基础研究面上项目2010ZC055

在线出版日期：2013-05-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：324-327