生物反应器培养Vero细胞生产肠道病毒71型

摘要：

目的 研究利用微载体技术规模化制备肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)的方法.方法 利用NBSCelliGen 310 5 L生物反应器进行Vero细胞微载体培养,考察了不同微载体Cytodex-1浓度(3、10、15、20 g/L)对Vero细胞生长代谢及细胞密度的影响,并且与细胞工厂(Cell factory,CF)中Vero细胞染毒后的病毒繁殖进行比较.分别采用上清液、洗涤液、洗脱液模式收毒,比较不同收毒方式中EV71的抗原含量及病毒滴度(CCID50).结果 采用10 g/L微载体浓度,批次培养方式培养Vero细胞120 h后,细胞密度可达5.47×106个/ml;当微载体浓度大于15 g/L时,由于葡萄糖消耗速度快,需采用灌注模式培养.按MOI 0.2染毒后,微载体培养的收毒时间比CF慢48 h,但其病毒滴度可达8.8 Log10CCID50/ml,约为CF的5倍.EV71与微载体存在离子交换吸附作用,按上清液加洗脱液方式收毒,抗原总量可达12 61 U/ml,约为CF的3倍.结论 已成功建立了生物反应器微载体5L发酵培养Vero细胞生产EV71的方法,为进一步EV71大规模培养以及疫苗研发奠定了基础.

关键词：肠道病毒71型、Vero细胞、生物反应器、微载体

所属期刊栏目：26

分类号：R373.2;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2013-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：256-259