高表达转录因子ZNF191基因的慢病毒颗粒的构建及鉴定
目的 构建转录因子ZNF191基因的慢病毒颗粒,为进一步研究ZNF191的生物学功能及其在肿瘤基因治疗方面的应用奠定基础.方法 从HEK293细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增ZNF191基因,亚克隆至pLVX-AcGFP-N1质粒中,经酶切及DNA测序鉴定正确后,将含有ZNF191基因的重组质粒pLVX-ZNF191结合辅助质粒转染HEK293T细胞,包装重组慢病毒,Western blot检测感染的293T细胞内ZNF191蛋白的表达.结果 酶切及测序鉴定pLVX-ZNF191质粒构建正确,Westem blot检测重组慢病毒能显著提高293T细胞的ZNF191蛋白表达水平.结论 已成功构建了ZNF191基因重组慢病毒表达载体pLVX-ZNF191,为进一步研究ZNF191的生物学功能及肿瘤的基因治疗奠定了基础.
锌指蛋白、ZNF191基因、慢病毒
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Q782(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金30871353;第二军医大学大学生创新能力培养基金MS2011046
2013-04-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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