肺炎链球菌dnaJ基因缺陷对小鼠肺炎感染模型天然免疫应答的影响

摘要：

目的 探讨肺炎链球菌(Streptococcus pneumonia,S.Pn)dnaJ基因缺陷对肺炎感染模型小鼠天然免疫应答的影响.方法 将BALB/c小鼠随机分为空白对照组、D39感染组和△dnaJ感染组,分别经鼻腔滴注30μl无菌PBS、30 μl含2×107 cfu的S.pn D39和△dnaJ(dnaJ基因缺陷株)菌液,复制小鼠肺炎感染模型.于感染后6、12、24、36和48 h处死小鼠,取肺组织,匀浆后分离上清,ELISA检测促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IFNγ的表达水平,HE染色观察感染12 h的小鼠肺组织炎症反应变化；将小鼠巨噬细胞株RAW264.7体外感染S.pn D39和△dnaJ,细菌与细胞的比例为100∶1,感染1、2、3h后分离细胞培养上清液,ELISA检测TNF-α和IL-6的表达水平.实时定量PCR和 Western blot分别检测感染12 h的小鼠肺组织中模式识别受体TLRs基因mRNA的转录水平和炎症相关信号p38MAPK的磷酸化水平.结果 与D39感染组相比,△dnaJ感染组小鼠肺组织炎症反应强度下降,TNF-α、IL-6和IL-1β等促炎因子水平达峰时间延迟,且峰值降低,RAW264.7细胞感染3h分泌TNF-α和IL-6显著减少(P＜0.01或P＜0.05)；小鼠肺组织Tlr2和Tlrl3基因mRNA转录水平显著降低(P＜0.05),p38MAPK的磷酸化水平也明显下降.结论 肺炎链球菌dnaJ基因缺陷可下调肺炎感染模型小鼠的炎症反应、促炎因子分泌及胞内信号分子的激活,也可影响小鼠感染后肺组织中Trl2和Tlrl3基因mRNA的表达,为进一步研究机体对肺炎链球菌DnaJ蛋白的天然免疫应答分子机制奠定了基础.

关键词：肺炎链球菌、DnaJ、促炎因子、TLRs、p3 8MAPK

所属期刊栏目：26

分类号：R378.1+4;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81102225

在线出版日期：2013-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：160-165