表达重组谷氨酸脱羧酶工程菌发酵条件的优化
目的 对表达谷氨酸脱羧酶(Glutamate decarboxylase,EC4.1.1.15,简称GAD或GDC)的重组大肠杆菌的发酵条件进行优化.方法 通过单因素试验优化表达GAD的重组大肠杆菌B3C1的诱导剂IPTG添加时间、IPTG浓度、诱导时间、诱导温度,再经响应面分析法优化工程菌的发酵条件(氯化钠、胰化蛋白胨、酵母粉、摇床转速、初始pH值、培养时间、接种量、装液量).结果 工程菌的最佳诱导条件为:IPTG添加时间为工程菌接种后4h,IPTG浓度为0.8 mmol/L,诱导时间为4h,诱导温度为35℃;工程菌的最佳发酵条件为:酵母粉1.01%,氯化钠0.6%,胰化蛋白胨1.5%,培养时间11.25h,摇床转速250 r/min,初始pH值6.5,接种量3.0%,装液量11.70 ml.工程菌在该条件下发酵培养,GAD酶活达1 227.33 U,比优化前提高了12.29%.结论 已成功对表达GAD的重组大肠杆菌的发酵条件进行了优化,为其工业化生产奠定了基础.
谷氨酸脱羧酶、发酵、优化
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Q789(基因工程(遗传工程))
2013-03-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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