人源化抗表皮生长因子受体单克隆抗体质控方法的建立
目的 建立人源化抗表皮生长因子受体(Epithelial growth factor receptor,EGFR)单克隆抗体的质控方法.方法 采用体外细胞生长抑制试验测定人源化抗EGFR单抗的生物学活性；质谱法和还原型SDS-PAGE法测定其准确相对分子质量；去封闭后用Edman降解法测定其N-末端氨基酸序列；SDS-PAGE和分子排阻高效液相色谱(SEC-HPLC)法测定其纯度；反向液相色谱( RP-HPLC)法测定其肽图；定量PCR法和狭缝杂交法测定其外源性DNA残留量；其余项目按《中国药典》三部(2010版)要求进行.结果 人源化抗EGFR单抗原液和成品的相对生物学活性分别为(100±20)％和(94±14)％；质谱法测得该单抗参考品轻、重链的相对分子质量分别为23 370.75和50 341.00,相对误差分别为0.005％和0.006％;还原型SDS-PAGE测得该单抗轻、重链的相对分子质量为27 000和53 400;轻、重链N-末端氨基酸序列均与理论一致；单抗原液的还原型SDS-PAGE纯度为98.5％; SEC-HPLC原液纯度为(98.39±0.05)％和成品SEC-HPLC纯度为(98.17±0.04)％；肽图图谱与理化参考品一致；定量PCR测得其外源DNA残留量小于100 pg/剂量；其他各项指标均符合《中国药典》三部(2010版)要求及其他相关要求.结论 初步建立了人源化抗表皮生长因子受体单克隆抗体的质控方法,可用于该制品的常规质量控制.
表皮生长因子受体、人源化抗体、质量控制
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R392-33
国家863计划项目2007AA021601;重大新药创制2009ZX09307
2013-03-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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